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mIF多重免疫荧光

mIF多重免疫荧光

在同一组织切片上反复进行抗体染色,实现多重标记

产品参数

品牌Akoya
仪器名称Vectra Polaris全自动数字病理扫描系统
常见marker

CD3/4/8/11c/16/19/20/23/31/33/45/56/66b/68/138/163

F4/80、FOXP3、panCK、SMA、ki67、EPCAM、PD1、PD-L1

可定制可根据客户需求定制化panel


产品介绍

多重免疫荧光技术(Multiplex immunofluorescence,简称mIF),是指在同一组织切片上同时应用多种特异性抗体,通过不同的荧光染料标记,实现对多种抗原的同时检测。这一技术的核心在于酪胺信号放大系统(TSA),它利用辣根过氧化物酶(HRP)催化酪胺盐生成高活性的酪胺自由基,这些自由基与组织抗原周围的富电子酪氨酸残基共价结合,形成稳定的荧光沉积物。这种共价结合的方式相较于传统的氢键结合(一抗与二抗之间)更为稳固,即使在强烈的洗脱条件下也能保持信号的稳定,从而允许在同一组织切片上反复进行抗体染色,实现多重标记。

技术原理

利用辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测,该方法基于酪胺信号放大的多重顺次免疫染色技术,允许同时检测样本上的多个目标靶点。

 1 MIF实验原理

2 MIF研究流程


产品优势

  • 单一切片检测多靶标,提高检测效率,节省样本;

  • 原位展示+定量分析双重优势;

  • 高维度数据挖掘,支持共定位等分析(如免疫细胞与肿瘤细胞互作);

  • 展示空间位置关系,区分不同细胞亚群;

  • 可以实现灵活圈选。


应用方向

  • 肿瘤微环境;

  • 肿瘤免疫浸润;

  • 细胞衰老/凋亡/铁死亡/细胞自噬等;

  • 代谢、神经等相关领域;

  • 其他需要多个蛋白质靶标同时检测的领域。


结果展示

送样要求

样品类型

保存容

保存及运输

样本量

运输方式

备注

手术组织 (新鲜)

2mL 冻存管

含组织保护液

<25℃

 

m≥50mg

(黄豆样大小)

 

冰袋运输

组织块过大,须切割到米粒大小送检,确保组织完全浸泡于保护液中

1.5mL EP

无组织保护液

<-20℃

干冰运输

穿刺组织 (新鲜)

2mL 冻存管

含组织保护液

<25℃

 

长约 1-2 cm,直径约 0.1-0.2 cm 的组织条。

冰袋运输

确保保组织完全浸泡于保护液

建议多次穿刺(3针以上),以获取多根组织条,从而确保样本的代表性和研究成功率

1.5mL EP

无组织保护液

<-20℃

干冰运输

手术组织 (石蜡包埋)

白片盒或石蜡块

<37℃

白片≥6(白片厚度4-5μm),石蜡块中组织含量≥50mg(保存时间<2

常温运输

Ÿ不收取染色切片

Ÿ切片不可叠放

Ÿ切片完整、无破损 单张切片总面积>20mm^2

穿刺组织 (石蜡包埋)

白片盒或石蜡块

<37℃

白片≥6张(白片厚度4-5μm),石蜡块中组织含量≥50mg(保存时间<2年)

常温运输


液氮速冻组织

广口、密封性良好、耐腐蚀的塑料容器

无组织保护液

<-20℃

m≥50mg

(黄豆样大小)

 

干冰运输

手术离体后用纱布或滤纸吸干表面血液(防止结冰影响后续实验)


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