10x单细胞转录组测序

        单细胞转录组测序(single cell RNA sequencing，scRNA-seq)是一种以单个细胞作为对象用于分析细胞内基因表达情况的方法，其通过对单个细胞转录本进行扩增，标记建库后进行测序，最后对单个细胞转录组展开数据分析，获得多个细胞的基因表达谱。

       相对于传统测序技术得到的是数以万计细胞平均后的基因表达水平，单细胞转录组测序技术从单细胞层面上对细胞转录组进行分析，不仅是探索生物异质性最有力的途径之一，而且使生物研究达到了前所未有的分辨率和规模，为生命科学研究提供了新的视角与方法。

• 细胞分离与捕获：通过微流控芯片将单个细胞与带有独特条形码（Barcode）的凝胶微珠（Gel Bead）共同封装在油滴中，实现单细胞分离

• 逆转录与条形码标记：在油滴内，细胞裂解释放mRNA，逆转录生成cDNA，同时每条cDNA被微珠上的独特条形码标记，确保后续数据可追溯至单个细胞

• 文库构建：打破油滴，将带有条形码的cDNA片段进行扩增，并添加测序引物，构建高通量测序文库

• 高通量测序：对单细胞文库进行高通量测序，获取每个细胞的基因表达数据

• 数据分析：通过条形码信息将测序数据分配到单个细胞，进行基因表达定量、细胞类型鉴定及功能分析

图 | 10x Genomics单细胞转录组原理图（来源：10x Genomics）

图 |10x Genomics Chromium技术核心–油滴包裹的凝胶珠（GEMs）（来源：10x Genomics）

• 高通量：一次实验可分析数千至数万个细胞

• 高精度：独特条形码确保数据准确性

• 广泛应用：适用于发育、疾病、免疫等多领域研究

• 细胞图谱构建：精准鉴定细胞类型，揭示组织细胞组成与异质性

• 发育与分化研究：解析胚胎发育、组织形成及干细胞分化的分子机制

• 疾病机制探索：研究肿瘤异质性、免疫微环境及疾病相关细胞亚群

• 精准医学与药物研发：发现疾病标志物、药物靶点，推动个性化治疗方案

• 多组学整合分析：结合表观组、蛋白组数据，深入解析基因调控网络